菌B49乙醛乙醇脫氫酶基因克隆中的引物設(shè)計

論文類型	基礎(chǔ)研究	發(fā)表日期	2008-06-01
來源	哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)報
作者	林海龍,任南琪,鄭國香,張坤,段志潔
關(guān)鍵詞	乙醛乙醇脫氫酶基因; clustalw;生物制氫細(xì)菌;簡并引物
摘要	為研究乙醛乙醇脫氫酶基因及其在乙醇發(fā)酵生物制氫中的重要作用,采用clustalw對12個菌種的乙醛乙醇脫氫酶蛋白質(zhì)序列進(jìn)行多重比對分析,共得到6個保守區(qū),以這6個保守區(qū)設(shè)計引物,共選用9對簡并引物,命名為ADHJ1 、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9. 用這9對引物對B49總DNA進(jìn)行簡并PCR,共有兩對引物的擴(kuò)增得到預(yù)期的結(jié)果. 其PCR產(chǎn)物經(jīng)pMD18 - T克隆轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5α中,經(jīng)篩選后測序. 結(jié)果表明,這兩段DNA推導(dǎo)的氨基酸序

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